可見分光光度計是實驗室中一種常見且重要的分析儀器，廣泛應(yīng)用于教學(xué)研究、環(huán)境監(jiān)測、食品檢驗、藥品分析、工業(yè)生產(chǎn)控制等多個領(lǐng)域。其基本原理是利用物質(zhì)對單色光的吸收特性，進行定性或定量分析。正確、規(guī)范地操作儀器是獲得可信數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。本文將圍繞儀器的操作流程，闡述如何保障測試的質(zhì)量精度，滿足不同行業(yè)的應(yīng)用需求。

一、 操作前的準(zhǔn)備工作：

任何精密的測量都始于充分的準(zhǔn)備。在開機前，以下幾個步驟至關(guān)重要：

環(huán)境確認(rèn)： 確保儀器放置在穩(wěn)固、無振動的工作臺上，避免陽光直射和強氣流。環(huán)境溫度與濕度應(yīng)符合儀器工作要求，這是保證光學(xué)系統(tǒng)穩(wěn)定，減少基線漂移和噪聲的前提。

電源檢查： 連接符合規(guī)格的電源，確保接地良好，以防止靜電干擾和電子元件損壞。

樣品制備與比色皿選擇：

空白溶液與待測樣品： 必須使用相同的溶劑或背景溶液來配制空白（參比）和待測樣品，以消除溶劑和比色皿本身對光的吸收影響。

比色皿配對： 對于精度要求高的定量測試，建議使用經(jīng)過配對的比色皿。B1150C寬大的樣品室可容納5-100mm多種光程的比色皿，以適應(yīng)不同濃度樣品的測試需求，擴展了儀器的測試范圍。使用時，需保持比色皿透光面的清潔，嚴(yán)禁用手直接觸碰。

二、 開機與儀器初始化：

開機預(yù)熱： 打開儀器電源。光源（如鎢燈）和檢測器（如硅光電二極管）需要一段時間達到穩(wěn)定狀態(tài)。通常預(yù)熱時間為15-30分鐘。B1150C具備自動暗電流校正和空白校正功能，但充分的預(yù)熱是這些功能有效運行的基礎(chǔ)，能顯著提升光度準(zhǔn)確度和重復(fù)性。

參數(shù)設(shè)置： 根據(jù)實驗方案，通過儀器鍵盤設(shè)置所需的測量參數(shù)。

設(shè)定波長： 利用數(shù)字按鍵輸入特定波長，B1150C支持320~1100nm的波長范圍，并具備±0.5nm的波長準(zhǔn)確度，能夠滿足從紫外邊緣到近紅外區(qū)多數(shù)化合物的測定需求。其自動波長校準(zhǔn)和設(shè)定功能，減少了人為操作誤差。

選擇測量模式： 常見的模式包括透光率（T%）、吸光度（Abs）和濃度（Conc）。對于定量分析，需選擇濃度模式并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

三、 校準(zhǔn)與測量：

校準(zhǔn)是保證數(shù)據(jù)質(zhì)量精度的核心，其目的是建立測量的基準(zhǔn)線。

空白校正（100%T / 0Abs點）： 將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室，并關(guān)閉樣品室蓋。按下“自動調(diào)零"或“空白"鍵，儀器將自動以此為準(zhǔn)，將透光率校正為100%，吸光度校正為0.000。這一步有效地扣除了溶劑和比色皿的背景吸收，是后續(xù)所有測量的參照點。

樣品測量： 取出空白比色皿，放入盛有待測樣品的比色皿（注意方向一致性）。關(guān)閉樣品室蓋后，儀器會直接顯示該樣品在設(shè)定波長下的吸光度或透光率值。

四、 定量分析（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：

對于濃度測定，標(biāo)準(zhǔn)曲線法是遵循國家標(biāo)準(zhǔn)的常用方法，具有較好的準(zhǔn)確度。

配制標(biāo)準(zhǔn)系列： 準(zhǔn)確配制一組已知不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

建立曲線： 在儀器的定量測定功能中，依次測量各標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度。儀器（如B1150C）會自動記錄數(shù)據(jù)并繪制吸光度-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線，并可直觀顯示曲線圖譜。系統(tǒng)通常支持線性或非線性擬合。

未知樣品測定： 在建立好的標(biāo)準(zhǔn)曲線下，直接測量未知樣品的吸光度，儀器即可自動計算并顯示出其濃度值。如得利特B1150C的數(shù)據(jù)斷電保持功能，使得建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測試數(shù)據(jù)可以長期保存，方便后續(xù)調(diào)用，提升了工作效率。

五、日常維護與注意事項

規(guī)范的操作也包含對儀器的妥善維護。

樣品處理： 防止樣品溶液濺出，腐蝕樣品室。揮發(fā)性或腐蝕性強的樣品應(yīng)快速測量并及時清理。

光源壽命： 盡管采用長壽命設(shè)計，但減少不必要的開關(guān)機頻率有助于延長鎢燈的使用時間。

清潔與存放： 定期清潔樣品室和比色皿。儀器不使用時，應(yīng)覆蓋防塵布。

總結(jié)：

規(guī)范操作可見分光光度計是一個系統(tǒng)性的過程，從環(huán)境準(zhǔn)備、開機預(yù)熱、空白校正到樣品測量和數(shù)據(jù)處理，每一步都直接影響最終結(jié)果的質(zhì)量精度。選擇一臺光學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定（如單光束光路與全息光柵）、性能可靠（如低雜散光、高光度準(zhǔn)確度）、功能全面（支持光度、定量、掃描等多種模式）的儀器，是滿足教學(xué)、科研、工業(yè)、環(huán)保等多行業(yè)應(yīng)用需求，確保檢測方法科學(xué)、數(shù)據(jù)可比對、可追溯，并符合相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)對儀器性能要求的堅實基礎(chǔ)。通過掌握正確的操作方法并配合性能穩(wěn)定的儀器，操作者能夠高效、準(zhǔn)確地完成各類分析任務(wù)。